ATCC培养基的操作注意事项

　　ATCC培养基是微生物培养中常用的标准化培养基，其操作需严格遵循规范，以确保实验结果的准确性和可重复性。以下是操作时的关键注意事项：

　　一、培养基的选择与配制

　　1.明确培养基类型

　　根据微生物种类和实验目的选择合适的ATCC培养基配方。

　　注意培养基的pH值、渗透压和营养成分是否符合目标微生物的需求。

　　2.严格按配方配制

　　使用精确的电子天平称量试剂，避免称量误差。

　　溶解试剂时充分搅拌，确保完*溶解。

　　调节pH值至规定范围，避免过酸或过碱。

　　3.灭菌处理

　　液体培养基需高压灭菌，固体培养基需先灭菌后倒平板。

　　灭菌后立即使用或在无菌条件下保存，避免污染。

　　二、ATCC培养基操作注意事项：

　　1.无菌操作

　　在超净工作台或生物安全柜中进行接种、倒平板等操作，避免杂菌污染。

　　使用无菌器械，每次使用前需灼烧灭菌。

　　操作过程中避免说话、咳嗽或大幅移动，减少空气流动导致的污染。

　　2.接种规范

　　接种前确保微生物培养物处于对数生长期或适宜阶段。

　　控制接种量，避免过量导致菌落重叠或过少导致生长不良。

　　涂布平板时用力均匀，确保菌液均匀分布。

　　3.培养条件控制

　　根据微生物需求设置温度、气体环境和湿度。

　　倒置培养平板，避免冷凝水滴落冲散菌落。

　　三、ATCC培养基储存与有效期：

　　1.储存条件

　　未开封的培养基应存放在阴凉干燥处，避免光照和高温。

　　已配制的培养基需密封保存，防止吸潮或污染。

　　2.有效期管理

　　固体培养基平板应在4℃保存，最好在24~48小时内使用，避免干燥或污染。

　　液体培养基开封后需尽快使用，避免变质。

　　四、常见问题与解决

　　1.污染问题

　　若培养基出现霉菌、杂菌斑点，需检查无菌操作是否规范，器械是否灭菌彻*。

　　定期清洁超净工作台和实验区域，使用消毒剂（如70%乙醇）擦拭台面。

　　2.菌落异常

　　菌落形态、大小不一致：可能因接种量不均或培养基pH偏差，需重新配制培养基并规范操作。

　　菌落稀少或无生长：检查培养基配方、灭菌是否充分、微生物活性是否良好。

　　3.培养基干裂

　　固体培养基平板在长期培养后可能干裂，可通过加盖保湿或缩短培养时间改善。