5301星形细胞培养基是一种专门用于星形胶质细胞培养的无菌、液体培养基,通常包含基础培养基、胎牛血清、生长因子、抗生素等成分。
5301星形细胞培养基使用规范:
1.细胞接种
细胞密度:星形细胞接种密度根据细胞代次和状态调整。
预处理:接种前用培养基预润培养瓶/皿,避免细胞干燥损伤。
2.培养条件
温度:37℃恒温培养。
气体环境:5%CO2(维持pH稳定),部分星形细胞可能需要低氧条件。
换液频率:每2-3天更换新鲜培养基,避免代谢产物积累导致细胞毒性。
3.传代与冻存
消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液轻柔消化,血清终止消化。
冻存:使用含10%DMSO的冻存培养基,程序降温后转入-80℃或液氮保存。
5301星形细胞培养基注意事项:
1.避免污染
操作前紫外线消毒超净工作台30分钟,佩戴手套和口罩。
开封的培养基需在1个月内用完,避免反复冻融(可分装为单次用量)。
2.血清质量控制
胎牛血清需经过检测(如支原体、病毒、内毒素),热灭活可灭活补体成分。
不同批次血清可能影响细胞状态,建议批量采购并测试。
3.生长因子保存
bFGF/EGF需分装为小剂量,-20℃保存,避免反复冻融失效。
4.特殊需求调整
原代细胞培养:可能需要添加更高浓度血清或基质包被。
分化诱导:去除生长因子并添加低血清可诱导星形细胞分化。
