ITS 补充剂是一种重要的细胞培养基添加剂,主要成分包括重组胰岛素、转铁蛋白和亚硒**等。以下是其在细胞培养中起到的关键作用:
1.促进细胞增殖
加速营养物质摄取:胰岛素能够促进细胞对葡萄糖和氨基酸的吸收,为细胞提供能量与合成原料,进而支持蛋白质及核酸的生物合成,推动细胞生长分裂。
增强代谢活性:通过调控磷酸盐运输等过程优化细胞内的代谢路径,提升整体代谢效率,使细胞更高效地利用培养环境中的资源。
实验验证效果显*:例如在低血清条件下(如含2%胎牛血清的培养体系),添加ITS后AML12细胞数量大幅增加,存活率也明显提高。
替代部分血清功能:传统方法需加入较高浓度的胎牛血清以维持细胞生长,但ITS可通过模拟血清中的活性成分,将所需血清量从常规的10%降至2%-4%,减少动物源性成分的使用并降低成本。
适用于多种培养系统:无论是基础型还是复杂型培养基(如MEM、RPMI-1640或DMEM/F-12),均能有效发挥作用,兼容性强且操作便捷。
3.抗氧化与毒性防护
清除自由基损害:转铁蛋白作为铁离子载体,可结合游离铁防止其参与芬顿反应生成有害的氧自由基;同时亚硒**作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅助因子,直接中和过氧化氢等活性氧物质,双重机制保护细胞免受氧化应激损伤。
维持氧化还原平衡:这种协同作用有助于稳定细胞内外环境的氧化还原状态,保障长期培养时的细胞健康。
4.ITS 补充剂支持定向分化
诱导特定谱系发育:在间充质干细胞向软骨细胞分化的过程中,ITS能促进硫酸软骨素和胶质蛋白的表达,通过阿利新蓝染色可观察到典型的成软骨特征,显示出对细胞命运决定的调控能力。
适用于组织工程研究:此类特性使其成为再生医学领域制备功能性组织的有力工具。
5.提供必需微量元素
精准补充铁元素:转铁蛋白以可控方式释放微量铁离子,避免过量导致的毒性积累,同时满足细胞色素酶系等功能蛋白的合成需求。
动态调节矿物质水平:与其他成分共同作用实现微量元素稳态,确保细胞周期正常运转。
6.ITS 补充剂优化培养体系稳定性
浓缩配方灵活适配:通常以100倍浓缩液形式供应,可根据实验需求调整终浓度,既保证活性又便于标准化管理。
即用型解决方案:水溶性质地易于均匀分散于培养基中,减少沉淀风险,提高重复实验的一致性。
